第1038章 彭月娇怪病的破局!最终真相!(3/4)
许秋点头,示意他继续。
邱伟将早已经准备好的一份份实验数据送了过来。
许秋接过,仔细翻看。
在埃米尔唯一一次复现之后,各个组,都根据许秋的要求,开始调整不同的实验手段。
比如elisa法检测抗嗜沫凝聚杆菌igg/ig抗体……
然而最终的结果,od值始终小于01,这提示完全没有特异性抗体结合!
此外,westernblot分析中,倒是差点取得了成绩。
莫雷蒂组,在65kda处出现微弱条带!
然而令人遗憾的是,质谱鉴定为细菌hsp60!
这并不是致病性抗体,与嗜沫凝聚杆菌没有半点关系!
“失败的原因,大概率是因为hsp60与人类hsp60同源性高,导致交叉反应……”许秋分析。
因而第三轮改良,许秋又针对免疫荧光染色做出改动,尝试定位活菌!
手法也很简单。
首先,是细菌固定与载片制备。
活嗜沫凝聚杆菌悬液用4多聚甲醛固定15分钟,随后滴加10微升至聚赖氨酸包被的载玻片,室温干燥……
随后进行封闭与抗体孵育、封闭液,采取3bsa-pbs封闭30分钟。
一抗,利用患者血清1:50稀释,湿盒内37摄氏度孵育1小时。
二抗则fitc标记抗人igg,避光孵育1小时……
最终,在激发波长488n的荧光显微镜下,发现了微弱背景荧光!
而同一时间,放射性标记活菌追踪却让人绝望。
18f-fdg标记、sd大鼠经尾静脉注射18f-fdg标记菌悬液建立动物模型,最后pet-ct成像……
然而,不管是实验组还是对照组,都没有显示任何特异性放射性浓聚灶!
“各个组别,结果表现都比较一致,即便有反应,也是交叉反应……与嗜沫凝聚杆菌无关。”邱伟道。
说实话,此时他有点怀疑,嗜沫凝聚杆菌致病的研究方向是不是搞错了。
唯一有点用的,大概就是免疫荧光染色发现的微弱荧光了……迄今